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利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白  CNKI文献

CRSPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行有效定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的方向。本研究在双链结合蛋白(ds RNA-binding protein,DRB)DRB3和DRB5两个基因外显子的保守序列设计2个靶点,并构建与t RNA串联的双...

吴坤鑫 武亚丹... 《热带作物学报》 2018年07期 期刊

关键词: CRISPR/Cas9 / 基因编辑 / 拟南芥 / 双链结合蛋白

下载(193)| 被引(0)

橡胶树不同品系橡胶粒子蛋白的比较研究  CNKI文献

[目的]对橡胶树不同品系橡胶粒子蛋白进行比较研究。[方法]以11个橡胶树品系为试材,采用不同离心速度分级分离方法,获得不同直径大小的纯化橡胶粒子,分别洗脱其膜蛋白并作电泳SDS-PAGE分析,并比较了高产品系和低产品系...

吴坤鑫 王震... 《安徽农业科学》 2008年36期 期刊

关键词: 橡胶树 / 橡胶粒子膜蛋白 / 品系 / SDS-PAGE

下载(173)| 被引(10)

巴西橡胶树死皮机制的研究  CNKI文献

天然橡胶是重要战略物资和工业原料,而橡胶树“死皮”危害巨大,是产业发展的限制因子,因此研究和阐明橡胶树死皮发生的机制,具有重大的理论和实际意义。在前期工作中,我们已经通过DDRT-PCR技术鉴定和克隆到了一个和死...

吴坤鑫 导师:陈守才 华南热带农业大学 2005-05-01 博士论文

关键词: 巴西橡胶树 / 死皮病 / 程序性细胞死亡HbMyb1 / 机制

下载(398)| 被引(3)

At2g04450启动子的克隆和启动活性分析  CNKI文献

为明确拟南芥At2g04450启动子对靶标基因表达的启动作用,根据已报道的拟南芥基因组序列设计合成1对引物,以拟南芥基因组DNA为模板克隆At2g04450上游调控序列,并与pBAR-GUS中间表达载体相连构建植物表达载体p04450p-GU...

吴坤鑫 张秀春... 《热带作物学报》 2014年01期 期刊

关键词: At2g04450启动子 / GUS活性 / 组织表达特异性

下载(89)| 被引(0)

巴西橡胶树胶乳DNA的提取及特性分析  CNKI文献

利用改良的SDS-醋酸钾沉淀法可以有效分离纯化胶乳DNA。胶乳经过高速离心后分为3层,上层主要是橡胶粒子,中间层是胶乳的可溶性胞质成分即C-乳清,下层主要是黄色体。分别对这3层组份进行DNA提取分析,结果显示胶乳DNA主...

吴坤鑫 王震... 《热带作物学报》 2013年12期 期刊

关键词: 橡胶树 / 胶乳 / 脱氧核糖核酸 / 特性分析

下载(91)| 被引(0)

热带牧草种子抗真菌蛋白筛选初报  CNKI文献

利用琼脂纸片扩散法对262种热带牧草种子水提取物进行抑立枯丝核菌活性试验,结果表明:其中有24种热带牧草种子的水提取物对立枯丝核菌菌丝生长具有显著的抑制作用,它们分属金合欢属、朱缨花属、蝶豆属、银合欢属、决明...

吴坤鑫 张秀春... 《广东农业科学》 2008年11期 期刊

关键词: 热带牧草 / 立枯丝核菌 / 种子蛋白 / 抗真菌蛋白

下载(49)| 被引(0)

橡胶草根部离体培养诱导植株的研究  CNKI文献

以橡胶草的根部作为外植体进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明:橡胶草根部外植体防止褐化的最佳方法为MS+500 mg/L AC预培养3 d;根部愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D,平均诱导率为90%;...

贾瑞 吴坤鑫... 《热带作物学报》 2015年04期 期刊

关键词: 橡胶草 / 愈伤组织 / 再生体系

下载(190)| 被引(4)

基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑  CNKI文献

RNA沉默是植物重要的抗病毒防御机制,双链RNA结合蛋白(dsRNA-binding proteins, DRB)是RNA沉默信号途径中的关键蛋白。DRB1/HYL1是拟南芥基因组编码的7个DRBs之一,本研究将人工合成含2个AtHyl1靶位点序列的串联t RNA-...

武亚丹 吴坤鑫... 《基因组学与应用生物学》 2019年06期 期刊

关键词: CRISPR/Cas9 / 基因编辑 / AtHyl1 / 拟南芥三突变体hyl1dcl2drb4

下载(563)| 被引(3)

橡胶树羟基腈水解酶基因的克隆、表达和基因家族分析  CNKI文献

植物体内羟基腈水解酶(HNL)催化羟基腈类化合物水解,释放氢氰酸,抵御害虫和病原菌的侵害。橡胶树是产氰植物,生物信息学研究表明,橡胶树有6个HNL基因,在分子进化分析中与大戟科其他植物的HNL基因聚为一类,与十字花科等...

丁梅 吴坤鑫... 《热带作物学报》 2016年11期 期刊

关键词: 巴西橡胶树 / HbHNL-1 / 基因克隆 / 基因表达分析

下载(100)| 被引(1)

利用mRNA差别显示技术分离橡胶树死皮病相关cDNA  CNKI文献

从中国热带农业科学院橡胶树早期预测试验地采集不同品系的橡胶树胶乳和树皮组织,分别提取纯化mRNA合成cDNA第一链。通过4个简并锚定引物和10个随机引物进行PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了至少4个差异DN...

黄贵修 吴坤鑫... 《热带作物学报》 2002年03期 期刊

关键词: 巴西橡胶树 / 死皮病 / mRNA / 差别显示

下载(216)| 被引(26)

一种改良的橡胶树胶乳总RNA提取方法  CNKI文献

橡胶树胶乳总RNA提取过程中 ,常常遇到胶乳收集需要时间长 ,需去除橡胶粒子才能提取RNA等困难 ;利用常规方法提取的胶乳总RNA通常产量较低、易降解、体外翻译困难等。本文介绍一种改进的LiCl沉淀法 ,不需预先去除橡胶...

黄贵修 吴坤鑫... 《华南热带农业大学学报》 2002年04期 期刊

关键词: 橡胶树胶乳 / LiCl沉淀法 / 总RNA提取

下载(194)| 被引(17)

紫萍休眠体形成条件的研究  CNKI文献

以采自海南的紫萍DW2501-4和湖北的紫萍HB0301作为材料,研究缺素、脱落酸(ABA)、温度和光照时间对紫萍休眠体形成的影响,通过单因子实验和正交实验获得紫萍休眠体形成的最佳诱导条件。单因子诱导实验结果表明:缺氮能快...

李兰芝 吴坤鑫... 《分子植物育种》 2016年12期 期刊

关键词: 紫萍 / 休眠体 / 缺素 / ABA

下载(64)| 被引(0)

拟南芥AtNUDT8启动子的分离及其功能分析  CNKI文献

根据已发表的拟南芥基因组序列设计合成一对引物,以拟南芥基因组DNA为模板克隆AtNUDT8上游非编码区,并与pBAR-GUS3相连构建了植物表达载体pNUDT8P-GUS,采用农杆菌GV3101介导的渗透法转化野生型拟南芥,通过除草剂筛选获...

张秀春 吴坤鑫... 《热带作物学报》 2012年02期 期刊

关键词: 启动子 / AtNUDT8克隆 / GUS染色

下载(117)| 被引(3)

橡胶延长因子的cDNA克隆及序列分析  CNKI文献

橡胶延长因子是一种在胶乳中与橡胶粒子紧密结合的蛋白 ,约占整个胶乳中总蛋白的10 %~ 60 %。它是异戊二烯转移酶催化多聚异戊二烯单元添加到橡胶分子上必不可少的成分 ,在橡胶分子聚合中起着重要作用。从胶乳中克隆...

彭世清 吴坤鑫... 《华南热带农业大学学报》 2000年02期 期刊

关键词: 橡胶 / 橡胶延长因子 / 克隆

下载(147)| 被引(23)

紫萍休眠体的萌发诱导研究  CNKI文献

以紫萍DW2501-4和HB0301产生的休眠体为材料,利用单因子试验和正交试验研究不同蔗糖含量、不同的GA3浓度、不同的温度和光照条件诱导紫萍休眠体萌发的最适条件。结果表明,在1%~5%质量浓度蔗糖范围内,高的蔗糖质量浓度...

李兰芝 吴坤鑫... 《江苏农业科学》 2016年12期 期刊

关键词: 紫萍 / 休眠体 / 萌发 / 最佳条件

下载(56)| 被引(0)

人工合成靶序列快速构建多靶标RNAi表达载体  CNKI文献

番木瓜环斑病毒(PRSV)正引起番木瓜毁灭性严重病害,番木瓜叶扭曲花叶病毒(PLDMV)也在威胁着目前转基因番木瓜的推广和应用。通过人工合成包含PRSV和PLDMV两种病毒的NIb和HcPro基因多个保守区域的靶序列作为模板,扩增两...

张秀春 吴坤鑫... 《广东农业科学》 2016年07期 期刊

复合相变储能材料在大体积混凝土中的控温性能  CNKI文献

针对大体积混凝土易出现的温度裂缝问题,利用相变储能材料(PCM)在特定温度范围内的热效应来控制大体积混凝土内部温度场,降低了混凝土内部温度应力,有效防止大体积混凝土温度裂缝的出现。利用自行设计的温度测试系统,...

周双喜 荣茂阁... 《华东交通大学学报》 2013年04期 期刊

关键词: 复合相变材料 / 大体积混凝土 / 温度裂缝

下载(496)| 被引(38)

橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备(英文)  CNKI文献

[Objective] The aim of this study was to prepare the recombination protein of rubber elongation factor and its polyclonal antibodies.[Method] The encoding gene of rubber elongation factor(REF)was amp...

陈章权 吴坤鑫... 《Agricultural Science & Technology》 2008年04期 期刊

关键词: Rubber / elongation / factor / Gene

下载(41)| 被引(7)

拟南芥AtNUDT2启动子的分离及其功能分析  CNKI文献

根据已发表的拟南芥基因组序列设计合成1对引物,以拟南芥基因组DNA为模板克隆AtNUDT2上游非编码区,并将其与pBAR-GUS3相连,构建了植物表达载体pNUDT2P-GUS,采用以农杆菌GV3101介导的渗透法转化野生型拟南芥,通过除草剂...

张秀春 吴坤鑫... 《热带生物学报》 2012年02期 期刊

关键词: 启动子 / AtNUDT2 / 克隆 / GUS染色

下载(60)| 被引(0)

橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备  CNKI文献

[目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表...

陈章权 吴坤鑫... 《安徽农业科学》 2008年29期 期刊

关键词: 橡胶延长因子 / 基因 / 表达 / 抗体

下载(91)| 被引(1)

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