ICE1是CBF冷响应通道的上游转录调控因子,通过与CBF启动子中MYC顺式作用元件的结合激活CBF3基因表达。采用RT-PCR方法,从拟南芥获得AtICE1基因,将AtICE1导入pCAMBIA1301构建35S∷AtICE1植物表达载体。通过根癌农杆菌G...
苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)和苹果褪绿叶斑病毒(Apple cholortotic leaf spot virus,ACLSV)是危害梨和苹果及其它一些果树的重要病毒,对果树的生长、产量、果品质量等造成严重的影响。本研究以ASG...
来源于桃和苹果的苹果褪绿叶斑病毒的部分分子生物学特性和... CNKI文献
从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因...
苹果茎沟病毒梨分离物外壳蛋白基因的克隆和序列分析 CNKI文献
选取生物学和血清学特性存在较大差异的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)梨分离物P-6-1-17、P-4- 1-69、P-L2和P-D-21,采用RT-PCR法对3’端进行扩增,所获扩增片段经序列测定,全长分别为1089 nt(P-6-1-17...
通过昆诺藜接种鉴定和 ELISA 检测,从梨和苹果上分离获得苹果茎沟病毒(Apple stem groo-ving virus,ASGV)23个分离物。采用 TC-RT-PCR 对这些分离物进行扩增,均获得特异的扩增片段,PCR 产物经5%PAGE 电泳,出现大小约5...
郑银英 王国平... 《植物保护学报》 2005年03期 期刊
关键词： 苹果茎沟病毒 / 酶联免疫吸附反应 / 试管捕捉反转录-聚合酶链式反应 / 序列测定
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酵母pac-1基因的克隆、原核表达及其植物表达载体的构建 CNKI文献
pac-1基因来自于粟酒裂殖酵母(Schlzosaccharomyces pombe)菌，它编码的蛋白是一类依赖dsRNA的核糖核酸酶。因此，pac-1基因的表达产物可应用于降解dsRNA病毒基因组、ssRNA病毒基因组的复制中间体和类病毒的复制中间体...
DELLA蛋白是GA信号响应的关键负调节因子,本文采用基于EST的电子克隆方法,从棉花中克隆了DELLA蛋白家族的一个成员GhGAI。根据电子克隆序列,从陆地棉花胚珠cDNA中扩增得到GhGAI全长基因片段。将其在原核中表达,得到了...
应用RNAi技术获得抗ToMV和CMV转基因烟草 CNKI文献
为了获得同时抗ToMV和CMV的转基因烟草,采用以ToMV和CMV部分CP基因片段作为干扰病毒的靶序列,构建了pBi35SG12RNAi表达载体。利用农杆菌介导法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),经卡那霉素筛选、PCR鉴定证明干扰序...
农杆菌介导法获得转pac1基因小麦并表现对大麦黄矮病毒的抗... CNKI文献
自裂殖酵母中克隆得到pac1基因,与GenBank中相关的核苷酸序列有99.3%的相似性.编码蛋白质序列分析表明,其具有RNaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域.体外活性测定表明,以pET-5a系统在大肠杆菌中表达的pac1产物能够降解ds...
本研究以加工番茄红番3号子叶为外植体,对加工番茄再生体系无菌苗的苗龄、培养基激素的配比和培养基基质选择方面进行优化。结果表明:8～10 d的子叶为最佳的外植体。以MS为基本培养基,附加不同浓度IAA(0.05、0.10、0....
【目的】通过嫁接木本指示植物进行柑橘类病毒鉴定需要合适的季节和较长的显症时间,并且柑橘木本指示植物的遗传转化和基因功能验证体系尚不成熟,研究其与寄主间的互作较为困难。因此,寻找合适的草本鉴定和实验寄主对...
[目的]构建抗黄瓜花叶病毒RNAi载体,并将载体转入烟草。[方法]采用RT-PCR方法,扩增黄瓜花叶病毒NS04加工番茄分离物的RNA2基因组的序列。选取CMVRAN2基因组中的复制酶片段作为靶序列,构建pBi35SCR2真核表达载体,并对表...
抗黄瓜花叶病毒RNAi载体的构建及烟草的转化(摘要)(英文) CNKI文献
[目的]构建抗黄瓜花叶病毒RNAi载体,并将载体转入烟草。[方法]采用RT-PCR方法,扩增黄瓜花叶病毒NS04加工番茄分离物的RNA2基因组的序列。选取CMV RAN2基因组中的复制酶片段作为靶序列,构建pBi35SCR2真核表达载体,并对...
苹果茎沟病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备 CNKI文献
构建了来源于梨的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)分离物P-4-1-69和P-L2的原核表达载体pET-P-4-1-69和pET-P-L2,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1 mmol.L-1 IPTG下诱导表达。SDS-PAGE和用商业化ASGV抗体对诱导...
稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)是一种半腐生病原菌,该病原菌可以侵染水稻,产生稻瘟病。对于水稻与稻瘟菌的互作机制,人们已经进行了大量的研究。然而,鉴于水稻基因组相对较大且稻瘟菌生理小种众多,致使研究进展缓慢。本...
抗番茄花叶病毒RNAi载体的构建及烟草遗传转化 CNKI文献
为了获得抗番茄花叶病毒的转基因烟草,试验采用RT-PCR技术扩增新疆加工番茄花叶病毒基因组,然后与已知株系序列比对获得相应的保守序列。根据保守区选择干扰序列并设计引物进行PCR扩增,构建了pBi35STo5,pBi35SToBK,pB...
库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化 CNKI文献
为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354bp(PCR-CLB)作为靶标基因。以植...
番茄N-聚糖酶基因SlaPNGase1的功能分析 CNKI文献
番茄(Solanum lycopersicum)作为新疆红色产业，对当地经济发展有重要意义。由于新疆气候特点，无霜期较短，导致番茄被集中采收。加工能力不足，番茄采摘后被搁置数天，伴随高温天气，番茄成熟过度，导致软化变质，造...
CMV 2b和ToMV CP酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活效应... CNKI文献
通过RT-PCR从CMV和ToMV新疆分离物中扩增出CMV 2b和ToMVCP这2个基因,按正确方向将目标片段分别插入诱饵载pSos中,并将重组质粒导入酵母温度敏感酵母菌株cdc25H,检测其表达产物对酵母Sos恢复系统Ras信号通路的激活作用...
