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核苷磷酸化酶的克隆、表达与应用  CNKI文献

核苷类物质为重要抗病毒抗肿瘤药物的来源。许多核苷类药物,如齐多夫定、利巴韦林、拉米夫定、卡培他滨等均在临床上得到广泛应用。核苷类物质一般采用化学合成的方法,使用到大量有毒有害的试剂,给环境带来严重的污染...

丁庆豹 导师:魏东芝 华东理工大学 2010-03-09 博士论文

关键词: 核苷磷酸化酶 / 嘌呤核苷磷酸化酶 / 尿苷磷酸化酶 / 胸苷磷酸化酶

下载(627)| 被引(8)

乙酰短杆菌酶法合成5-甲基尿苷  CNKI文献

用乙酰短杆菌完整细胞为酶源,以鸟苷和胸腺嘧啶为底物,酶法合成5-甲基尿苷。最佳反应条件为:底物浓度100~200mmol/L,pH8.0,磷酸盐缓冲液浓度10~50mmol/L,60°C,摇床转速...

丁庆豹 邱蔚然 《华东理工大学学报》 1999年03期 期刊

关键词: 酶法合成 / 5-甲基尿苷 / 乙酰短杆菌

下载(145)| 被引(11)

重组尿苷磷酸化酶的诱导及其在嘧啶核苷生物合成中的应用(英...  CNKI文献

Recombinant Escherichia coli pUDP,which overexpressed uridine phosphorylase(UPase),was constructed.0.5 mmol·L 1lactose had a similar induction effect as the commonly used inducer IPTG during 2.5...

丁庆豹 欧伶... 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 2011年01期 期刊

关键词: 5-fluorouridine / lactose / uridine / phosphorylase

下载(92)| 被引(2)

大肠杆菌酸性磷酸酶基因克隆表达及应用  CNKI文献

将大肠杆菌K-12的酸性磷酸酶(AphA)完整基因和去信号肽基因分别克隆到pET-28a(+)载体上,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。经诱导检测,重组菌均能表达出高活性的可溶性酶蛋白,去信号肽表达更稳定。对重组菌的活性研究表明...

黄莹 丁庆豹... 《生物技术通报》 2012年05期 期刊

关键词: 大肠杆菌 / 酸性磷酸酶 / IMP

下载(194)| 被引(3)

大肠杆菌L-阿拉伯糖异构酶的克隆表达及D-塔格糖的制备  CNKI文献

将大肠杆菌K-12中的L-阿拉伯糖异构酶基因araA克隆到载体pET-28a上,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中表达。通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性酶蛋白。以重悬菌液为酶源、D-半乳糖为底物,对酶转化D-塔格糖...

王栋 丁庆豹... 《中国食品添加剂》 2010年05期 期刊

关键词: 大肠杆菌 / L-阿拉伯糖异构酶 / D-塔格糖 / 表达

下载(249)| 被引(3)

超声提取韭菜籽生物碱工艺及其活性研究  CNKI文献

对韭菜籽生物碱的超声提取工艺进行了研究,在提取溶剂、提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、料液比等单因素的基础上,研究了韭菜籽生物碱的超声提取法,对料液比、温度、时间、提取次数等提取因素进行优化,结果表明通过...

郭奎彩 丁庆豹... 《中国食品添加剂》 2015年02期 期刊

关键词: 韭菜籽 / 生物碱 / 提取工艺 / 活性

下载(273)| 被引(3)

利用固定化啤酒酵母合成5’-核苷三磷酸  CNKI文献

固定化啤酒酵母细胞由5’-核苷一磷酸(NMPs)合成5’-核苷三磷酸(NTPs)。在250mL摇瓶中加入20g固定化酵母细胞和20mL反应液(NMP 40mmol/L,葡萄糖150mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液250 mmol/L,硫酸镁10mmol/L),pH 7.0,35℃...

由洋 丁庆豹... 《工业微生物》 2007年02期 期刊

麦芽根中5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的提取  CNKI文献

建立一种高效快速的从麦芽根中提取5′-磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的方法。通过将麦芽根粉碎后,取一定粒度的麦芽根加一定量的去离子水浸泡,过滤后得粗酶液。用紫外分光光度法测定5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的酶活,...

张群 丁庆豹... 《生物技术通报》 2008年S1期 期刊

关键词: 麦芽根 / 5′-磷酸二酯酶 / 5′-磷酸单酯酶 / 提取

下载(162)| 被引(3)

酶法合成核苷类抗病毒药物  CNKI文献

综述了近几年酶法合成核苷类抗病毒药物的研究进展,主要包括核苷磷酸化酶、N-脱氧核糖转移酶的应用,以及应用一些酶进行糖或碱基的修饰等方面。

邱蔚然 丁庆豹 《中国医药工业杂志》 1999年10期 期刊

关键词: 核苷磷酸化酶 / N-脱氧核糖转移酶 / 抗病毒核苷

下载(442)| 被引(48)

酶法合成抗病毒药物阿糖腺苷  CNKI文献

目的:为了开发一种生产阿糖腺苷的有效方法。方法:研究了以产气肠杆菌完整细胞为催化剂酶法合成阿糖腺苷,优化了菌体培养条件以及酶反应条件。结果:在培养基中添加0.5%葡萄糖,33℃下培养16h,既能得到较多菌体,又能使菌...

郭勇莉 丁庆豹... 《生物技术》 2006年01期 期刊

关键词: 产气肠杆菌 / 阿糖尿苷 / 阿糖腺苷 / 尿苷磷酸化酶

下载(458)| 被引(14)

应用乙酰短杆菌酶法合成2’-脱氧腺苷  CNKI文献

胸苷和腺嘌呤在乙酰短杆菌作用下转化成胸腺嘧啶和目标产物2’-脱氧腺苷。50mL的三角瓶装液10mL,40mmol/L的底物,50mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH7)进行反应,5%游离乙酰短杆菌在55℃下,经1h转化率就可达到65.6%。

洪云海 丁庆豹... 《工业微生物》 2006年01期 期刊

关键词: 核苷磷酸化酶 / 乙酰短杆菌 / 2’-脱氧腺苷 / 酶法合成

下载(215)| 被引(15)

胞苷生产菌的选育及发酵  CNKI文献

目的选育胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌,提高胞苷发酵单位,并对间歇补料分批发酵方式进行了初步研究。方法(1)以胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌CDS36为突发菌株,对其进行紫外诱变,经6-杂氮尿嘧啶(6AU)、5-氟胞苷(5FCR)等进...

张春艳 丁庆豹... 《中国热带医学》 2009年02期 期刊

关键词: 胞苷 / 枯草芽孢杆菌 / 菌种选育 / 补料分批发酵

下载(205)| 被引(13)

胞苷生产菌的选育  CNKI文献

目的:筛选得到胞苷发酵单位较高的菌株,并对发酵过程作初步研究。方法:以胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌DOS7为出发菌株,对其进行紫外诱变、5-氟胞苷(5FCR+)和2-杂氮尿嘧啶抗性(2AU+)抗性筛选。结果:通过紫外诱变和抗性筛...

盛春雷 丁庆豹... 《生物技术》 2007年05期 期刊

关键词: 胞苷 / 枯草芽孢杆菌 / 菌种选育 / 发酵

下载(165)| 被引(14)

利用κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶固定化酵母生产三磷酸腺苷  CNKI文献

利用κ 卡拉胶 魔芋多糖复配胶包埋的固定化啤酒酵母细胞 ,由腺苷 (AR)生产三磷酸腺苷 (ATP)。采用HPLC法分析固定化细胞反应过程核苷 (酸 )的变化以及用琼脂糖平板电泳法对其工艺条件进行了优化。固定化细胞反应 1h ...

唐学友 丁庆豹... 《药物生物技术》 2000年04期 期刊

关键词: 固定化啤酒酵母细胞 / ATP / κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶

下载(153)| 被引(21)

化学酶法合成抗病毒药物2’,3’-双脱氧腺苷  CNKI文献

2’,3’-双脱氧腺苷(ddA)具有良好的抗病毒作用。以胸苷为起始原料,经由酰化、环化、开环、催化加氢生成2’,3’-双脱氧胸苷(ddT),然后ddT和腺嘌呤在胡萝卜软腐欧文氏杆菌的作用下转化成胸腺嘧啶和ddA。结果显示在最佳...

辛自豪 丁庆豹... 《药物生物技术》 2007年04期 期刊

关键词: 2’ / 3’-双脱氧腺苷 / 胡萝卜软腐欧文氏杆菌 / 化学酶法

下载(189)| 被引(8)

酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷  CNKI文献

将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导...

王丽慧 丁庆豹... 《华东理工大学学报(自然科学版)》 2011年03期 期刊

关键词: N-脱氧核糖转移酶II / 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 / 合成

下载(189)| 被引(4)

大肠杆菌胸苷激酶基因的克隆表达与应用研究  CNKI文献

目的:构建含大肠杆菌胸苷激酶基因(tdk)的重组质粒,并对胸苷激酶性质进行研究。方法:通过PCR技术从大肠杆菌K-12中扩增出tdk基因,并克隆到表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组菌株(DTK)。结果:成功...

张广宇 丁庆豹... 《生物技术》 2013年05期 期刊

关键词: 胸苷 / 胸苷酸 / 胸苷激酶

下载(90)| 被引(2)

大肠杆菌腺苷脱氨酶基因的克隆表达  CNKI文献

将大肠杆菌K12菌株来源的腺苷脱氨酶基因(add)克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测和酶活性的测定发现,重组菌表达产生大量腺苷脱氨酶,活性达到51.07U/mg蛋白。通过...

栾海涛 丁庆豹... 《生物技术通报》 2010年03期 期刊

关键词: 大肠杆菌 / 腺苷脱氨酶 / 基因工程

下载(256)| 被引(2)

两步酶法合成阿糖鸟苷(英文)  CNKI文献

The chemical synthesis of Guanine arabinoside(ara-G)is extremely complex,time-consuming,and se- riously polluted.A two-step enzymatic synthesis process was developed to acquire ara-G easily.2,6-Diami...

魏晓琨 丁庆豹... 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 2008年06期 期刊

关键词: guanine / arabinoside / 2 / 6-diaminopurine

下载(120)| 被引(6)

酶法合成抗癌新药氟铁龙前体——5-FUR  CNKI文献

筛选得到一株核苷磷酸化酶活力高的乙酰短杆菌 ,以该菌体为酶源酶法合成抗癌新药氟铁龙前体 5-氟尿苷 ,所用反应物为鸟苷和 5-氟尿嘧啶。在 1 50 m L的摇瓶装液 1 5m L的条件下进行研究 ,结果显示 :菌体添加量 2 0~ ...

闫蓬勃 丁庆豹... 《华东理工大学学报》 2001年02期 期刊

关键词: 酶法合成 / 5-氟尿苷 / 乙酰短杆菌 / 5-氟尿嘧啶

下载(124)| 被引(10)

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