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应用毕氏酵母高效表达耐高温植酸酶  CNKI文献

自然界很难获得大量的耐高温植酸酶。采取连续延伸PCR方法 ,按照毕氏酵母的偏爱密码 ,合成 1.3kb烟熏曲霉耐高温植酸酶基因 fphy。合成基因与野生型基因核苷酸序列同源性为 74 % ,但编码的氨基酸序列一致。将耐高温植...

彭日荷 熊爱生... 《生物化学与生物物理学报》 2002年06期 期刊

关键词: 热稳定植酸酶 / 基因合成 / 高效表达 / 毕氏酵母

下载(409)| 被引(66)

泛肽交联酶(E_2)通过苯丙氨酸解氨酶基因启动子参与水稻对紫...  CNKI文献

迄今为止,诱导苯丙类化合物和黄酮类化合物合成并造成类黄酮的积累被认为是植物抵御紫外光的惟一主要的途径。苯丙氨酸解氨酶(PAL)是苯丙类化合物合成的关键酶。通过体内足印试验表明,在pal-1基因启动子中有一段序列C...

彭日荷 姚泉洪... 《Acta Botanica Sinica》 2003年11期 期刊

关键词: 水稻泛肽交联酶 / 紫外防护 / 顺式元件 / 酵母单杂交体系

下载(167)| 被引(26)

苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因的合成及其在大肠杆菌中稳定...  CNKI文献

选用荧光假单胞菌偏爱密码 ,设计长 90bp左右的寡核苷酸引物 ,采用连续延伸PCR方法 ,合成了全长1.8kb的苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因。合成基因消除了潜在的 polyA加尾序列、mRNA不稳定序列以及发夹结构。和Perlak[1...

彭日荷 熊爱生... 《生物化学与生物物理学报》 2001年02期 期刊

关键词: 化学合成 / cryIA(c)Bt / 基因表达 / 杀虫活性

下载(182)| 被引(15)

甜菜多粘菌传带甜菜坏死黄脉病毒的细胞定位研究  CNKI文献

利用砂培体系继代培养不同病区甜菜多粘菌(Polymyxabetae),经酶联检测,分离得到2个带毒率高的分离株N,HR12。应用甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)抗血清和免疫金标记技术分析了甜菜根中P.b...

彭日荷 韩成贵... 《植物病理学报》 1998年03期 期刊

关键词: 甜菜多粘菌 / 甜菜坏死黄脉病毒 / 免疫胶体金标记

下载(63)| 被引(6)

砂培体系中甜菜多粘菌生物学特性的研究  CNKI文献

在改进的砂培体系中,甜菜多粘菌(Polymyxabetae)完成生活循环只需7天。利用砂培体系研究了多粘菌在不同pH值、光照、接种材料和接种量条件下,对寄主的侵染以及在其中繁殖的情况,研究了多粘菌完成侵染所需时间,侵...

彭日荷 韩成贵... 《菌物系统》 1997年04期 期刊

关键词: 甜菜多粘菌 / 砂培体系 / 生物学特性

下载(74)| 被引(3)

八棱海棠高效再生体系的建立及潮霉素的抗性试验  CNKI文献

以八棱海棠子叶为外植体,比较了不同浓度植物激素、不同激素组合、不同暗培养时间及不同浓度潮霉素对八棱海棠再生体系的影响,建立了八棱海棠高效再生体系,筛选并分析了潮霉素在八棱海棠遗传转化中的适宜浓度。结果表...

张苓 彭日荷... 《北方园艺》 2020年15期 期刊

关键词: 八棱海棠 / 再生体系 / 潮霉素 / 临界浓度

下载(164)| 被引(0)

小鼠2-5A合成酶cDNA克隆及全序列测定  CNKI文献

通过饲喂放线菌酮 ,提取小鼠肝脏的总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,利用RT PCR扩增出 110 0bp大小的片段 ,将其克隆入载体pBluescript,采取双链质粒直接测序 ,获得的序列与国外报道小鼠 2 5A合成酶基因序列具 99.8%的...

彭日荷 姚泉洪... 《中国病毒学》 2000年01期 期刊

关键词: 小鼠 / 25A合成酶基因 / 克隆 / 序列测定

下载(28)| 被引(1)

沪油15中两个AP2/ERF-B1亚族转录因子的克隆与分析  CNKI文献

利用油菜EST数据库,以拟南芥ERF-B1亚族转录因子序列为探针,电子克隆拼接得到2个cDNA序列(BnaERFB1-1和BnaERFB1-2),通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型油菜沪油15的DNA和cDNA中克隆了上述基因。克隆转录因子BnaERFB1-1...

庄静 彭日荷... 《核农学报》 2009年03期 期刊

关键词: AP2/ERF / B1亚族 / 转录因子 / 克隆

下载(252)| 被引(21)

信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响  CNKI文献

乙醇氧化酶启动子被分离、克隆 ,并建立了转化方法后 ,毕赤酵母已被发展成为一种高效的外源蛋白表达宿主。为了进一步提高外源蛋白质的分泌表达 ,对信号肽序列进行了研究。首先按毕赤酵母的偏爱密码合成了酿酒酵母的α...

熊爱生 彭日荷... 《生物化学与生物物理学报》 2003年02期 期刊

关键词: 毕赤酵母 / 信号肽序列 / 表达载体 / 高效表达

下载(1881)| 被引(138)

八棱海棠中转录因子基因MrDREBA6的克隆及表达分析  CNKI文献

DREB类基因是植物中重要的一类转录因子基因,其编码的产物广泛参与生长发育和各类生理过程。根据拟南芥和水稻DREB类基因序列,设计2个兼并引物,利用RACE法从八棱海棠cDNA文库中扩增出一编码DREB类转录因子的cDNA序列,...

付晓燕 彭日荷... 《果树学报》 2009年06期 期刊

关键词: 八棱海棠 / 转录因子 / RACE / DREB类

下载(376)| 被引(27)

带内含子卡那霉素抗性基因双元载体构建及烟草转化  CNKI文献

农杆菌介导法是植物基因转化的常用方法 ,然而由于筛选培养基中常用的抗生素头孢霉素和羧苄青霉素具有类植物激素活性 ,影响外植体的再生和转化频率。将一个植物的内含子插入卡那霉素抗性基因编码区的N端 ,合成了一个...

彭友良 彭日荷... 《植物生理学报》 2001年01期 期刊

关键词: 带内含子卡那霉素抗性基因 / GUS活性 / 烟草转化

下载(595)| 被引(24)

透明颤菌血红蛋白(VHb)基因合成及原核生物中的效应  CNKI文献

以“连续延伸 PCR基因合成法”(姚泉洪 1999) ,按植物偏爱密码子 ,合成了全长4 4 1bp的透明颤菌血红蛋白 (Vitreoscilla hemoglobin VHb)基因。此方法不需用连接酶 ,而用高保真 DNA聚合酶 pwo及 7个长度为 90 bp左右的...

熊爱生 彭日荷... 《上海农业学报》 2000年03期 期刊

关键词: 透明颤菌血红蛋白基因 / 基因合成 / 连续延伸PCR / 序列分析

下载(232)| 被引(26)

灰盖鬼伞漆酶在毕赤酵母中表达及条件优化  CNKI文献

根据灰盖鬼伞漆酶基因LCC1的蛋白序列和毕赤酵母的密码子偏爱性设计并合成CCLCC1I基因片段,将其连接到经过改造的pPIC9K质粒上构建分泌表达载体pYN2395;构建好的载体经BglⅡ酶切线性化后电激转化到毕赤酵母GS115中,通...

裴佐蒂 彭日荷... 《上海农业学报》 2014年04期 期刊

关键词: 漆酶 / 毕赤酵母 / 灰盖鬼伞 / 表达优化

下载(148)| 被引(3)

拟南芥热激因子cDNA的克隆及转化烟草研究  CNKI文献

拟南芥热激因子是一重要的耐热基因。从拟南芥幼苗中提取总RNA ,根据报道设计引物 ,利用RT PCR的方法扩增出大约 1.4kb的拟南芥热激因子基因Athsfc。将其克隆入pBluescriptSK载体的XbaI和SacI位点 ,测序结果显示核苷酸...

熊爱生 彭日荷... 《上海农业学报》 2003年01期 期刊

关键词: 拟南芥 / 热激因子基因 / 克隆 / 转基因烟草

下载(231)| 被引(12)

儿茶酚双加氧酶基因大肠杆菌表达体系研究  CNKI文献

从恶臭假单孢菌 (Pseudomonassp .S 47)的DNA中扩增得到 92 4bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段 ,将其构建入 pBluescriptSK载体 BamHI和 SacI位点间。测序结果显示与Kim ( 2 0 0 0 )报道一致。将该基因插入带庆大霉素抗...

熊爱生 彭日荷... 《上海农业学报》 2003年02期 期刊

关键词: 儿茶酚双加氧酶基因 / 克隆 / 表达 / 酶活分析

下载(213)| 被引(7)

生物体中的氧化还原系统及其效应  CNKI文献

生物体中的氧化还原系统主要是由一些富含半胱氨酸残基的蛋白质组成 ,通过巯基和二硫键的改变调节生物体中的氧化还原状态 ,从而实现对基因表达的调控

熊爱生 彭日荷... 《生命的化学》 2002年02期 期刊

关键词: 氧化还原系统 / 生物体

下载(296)| 被引(6)

植物中氧化还原系统对光合作用的调节  CNKI文献

植物中氧化还原系统对光合作用有着重要的调节作用,通过一些氧化还原蛋白在光照和黑暗中结构改变,使植物体内的氧化还原系统发生变化,实现对光合作用的调节。

熊爱生 彭日荷... 《生命的化学》 2002年05期 期刊

关键词: 氧化还原系统 / 光合作用 / 调节 / 植物

下载(210)| 被引(4)

透明颤菌血红蛋白的研究进展  CNKI文献

血红蛋白广泛存在于动植物、微生物中 ,是一种氧结合蛋白。透明颤菌血红蛋白是 2 0世纪 70年代后期发现的一种血红蛋白 ,该蛋白质能使细菌在低氧的情况下生存 ,并保持较高的生长速率。随着作用机理研究深入 ,透明颤菌...

熊爱生 彭日荷... 《生物学杂志》 2002年06期 期刊

关键词: 透明颤菌血红蛋白 / 作用机制 / 发酵工业 / 植物转基因

下载(161)| 被引(3)

巨峰葡萄查尔酮异构酶基因克隆及表达分析  CNKI文献

从一年生‘巨峰’扦插苗中克隆了CHI基因,并采用半定量RT-PCR技术,以actin基因为内参,分析了CHI基因在‘巨峰’葡萄果实不同发育阶段及组织的表达。序列分析表明:CHI基因序列中含有3个内含子,4个外显子。信息学分析显...

周军 姚泉洪... 《西北植物学报》 2009年09期 期刊

关键词: 克隆 / 半定量RT-PCR / CHI基因 / 生物信息学

下载(720)| 被引(42)

重叠延伸PCR技术及其在基因工程上的应用  CNKI文献

重叠延伸PCR技术(genesplicingbyoverlapextensionPCR,简称SOEPCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。此技术利用PCR技术...

徐芳 姚泉洪... 《分子植物育种》 2006年05期 期刊

关键词: 重叠延伸PCR / 互补引物 / 基因工程

下载(4051)| 被引(136)

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