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应用蛋白质L检测和纯化培养上清液中的单链抗体  CNKI文献

目的 探索一种检测和纯化单链抗体的新方法。方法 使用不同的酶标记物 ,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度。含单链抗体的培养上清液经超滤、313g L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L 琼脂糖亲和层析纯化单链...

李民友 虞东方... 《免疫学杂志》 2004年03期 期刊

关键词: 蛋白质L / 单链抗体 / 培养上清液 / 检测

下载(120)| 被引(4)

组胺H_1受体激动剂PEA抑制胃酸分泌效应的中枢机制  CNKI文献

本文分析了中枢注射PEA抑制胃酸分泌效应的脑内过程。雄性Wistar大鼠,摘除双侧肾上腺,用37℃的生理盐水通过恒流泵进行连续胃液流。第三脑室给药,观察其对五肽促胃液素(160μg/kg,s.c.)诱...

李民友 王竹立... 《生理学报》 1995年03期 期刊

关键词: PEA / 神经肽 / 第三脑室 / 胃酸分泌

下载(72)| 被引(5)

农村税费征收难的原因与解决办法  CNKI文献

90年代以来,农村税费征收越来越难。据湖南某县不完全统计,到1996年底,全县583个行政村累计欠税费2000多万元,最多的村累计欠70万元,人均欠518元,基层干部不得不举债垫税费。这已成为影响农村经济发展和政权巩固的严重...

李民友 《内部文稿》 1997年10期 期刊

关键词: 税费征收 / 集体观念 / 乡统筹 / 农业税费

下载(17)| 被引(0)

村级负债问题的调查  CNKI文献

村级负债问题已成为影响社会安定的一个重要因素。湖南某县589个村,到1996年底,累计负债1亿多元,每年需付利息3000多万元,已有121个村资不抵债。最近,笔者对该县3乡、2镇、30个村进行调查,情况实堪忧虑。30个村累计负...

李民友 《内部文稿》 1997年23期 期刊

关键词: 村级负债 / 村干部 / 高利贷

下载(13)| 被引(0)

抗人B型钠尿肽噬菌体抗体库的构建及噬菌体抗体的筛选  CNKI文献

目的利用噬菌体表面展示技术构建抗人B型钠尿肽(BNP)的单链噬菌体抗体库及筛选抗人BNP的特异性单链噬菌体抗体。方法从正常人外周血淋巴细胞提取总RNA,扩增抗体重链和轻链可变区基因片段,加入连接子并构建单链噬菌体抗...

刘世明 李民友... 《广东医学》 2006年12期 期刊

关键词: B型钠尿肽 / 噬菌体展示 / 抗体库 / 单链抗体

下载(110)| 被引(3)

班主任应重视与中专学生的情感交流  CNKI文献

班主任是中专学校思想政治工作中的主力军,班主任与中专学生进行正确的情感交流,有利于思想政治工作的深入开展。文章就班主任与中专学生情感交流的前提、条件和桥梁进行研究和探讨。

宋锁英 李民友 《中国科技信息》 2009年23期 期刊

关键词: 班主任 / 中专学生 / 情感交流

下载(23)| 被引(1)

DAPK1基因开放读码序列的克隆、序列分析及诱导Raji细胞凋亡  CNKI文献

目的 :探讨死亡相关蛋白激酶 (DAPK1)在肿瘤的形成、转移中所起作用 ,克隆DAPK1基因的开放读码序列 (ORF)。方法 :根据GenBank提供的核苷酸序列 ,自行设计引物 ,用RT -PCR从K562细胞中扩增DAPK1基因的ORF ;用质脂体将...

张海涛 朱振宇... 《中国病理生理杂志》 2004年01期 期刊

关键词: 死亡相关蛋白激酶 / 细胞凋亡 / 甲基化 / Raji细胞

下载(158)| 被引(11)

突变型K5重组蛋白抑制小鼠肝癌血管生成和肿瘤生长的作用  CNKI文献

目的:体内实验观察人纤溶酶原K5缺失突变体Ⅰ(K5 mut1)对HepA小鼠肝癌血管生成和肿瘤生长的影响。方法:大肠杆菌中表达,组氨酸结合柱亲和层析、纯化获得K5 mut1蛋白,SDS-PAGE和Western blot-ting方法鉴定其表达;建立皮...

杨霞 王青松... 《中国病理生理杂志》 2008年02期 期刊

关键词: 纤维蛋白溶酶原 / 突变 / / 肝细胞

下载(230)| 被引(5)

DAPK1基因转染对高转移性肺癌细胞PGCl_3的影响  CNKI文献

背景与目的:死亡相关蛋白激酶DAPK1失活是影响非小细胞肺癌患者生存的独立因子,过表达的DAPK1可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤转移,但抑制转移的机制尚未完全清楚。本文探讨DAPK1基因抑制高转移性肺癌PGCl3细胞生长及转...

张海涛 朱振宇... 《癌症》 2004年05期 期刊

关键词: 死亡相关蛋白激酶 / 肿瘤转移 / 非小细胞肺癌

下载(136)| 被引(7)

纤溶酶原Kringle5缺失突变体抑制血管内皮细胞增生的研究  CNKI文献

目的纤溶酶原蛋白水解片段Kringle 5(K5)具有治疗血管增生性疾病的潜在临床应用价值,但是K5已获得美国专利。本研究应用基因突变和基因重组技术获得缺失突变型(K5Mut1)并检测其体外活性。方法除去K5外环两端的N端和C端...

马建芳 杨中汉... 《第一军医大学学报》 2003年12期 期刊

关键词: 血管抑素 / 突变型Kringle5 / 血管增生抑制因子 / 血管增生性疾病

下载(172)| 被引(6)

人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达  CNKI文献

目的在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力。方法构建真核表达载体pc31/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine2000将其转...

熊茂林 宋畅... 《中国病理生理杂志》 2005年01期 期刊

关键词: 糖基磷脂酰肌醇类 / 基因 / B7-1 / CHO细胞

下载(147)| 被引(4)

抗人β-淀粉样肽特异性单链抗体的噬菌体抗体库的构建与初步...  CNKI文献

目的:运用噬菌体展示技术构建抗人β-淀粉样肽(Aβ)特异性单链抗体的抗体库并进行初步鉴定.方法:从Aβ免疫的BALB/c小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,分离纯化mRNA,经逆转录合成其总cDNA.以PCR方法分别扩增出抗体的重链(VH)...

段朝晖 毛越苹... 《第四军医大学学报》 2008年09期 期刊

关键词: 噬菌体展示技术 / 单链抗体 / 阿尔茨海默病 / β-淀粉样肽

下载(130)| 被引(3)

人纤溶酶原K5突变体Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化  CNKI文献

【目的】 构建人纤溶酶原Kringle 5(K5)的突变体Cys461-Cys540(K5 mut1),在大肠杆菌中表达,亲和层析纯化,为探讨K5抗血管增生活性与Kringle结构域的关系提供基础?【方法】 以K5全长cDNA为模板用PCR的方法扩增人纤溶酶...

蔡卫斌 李朝阳... 《中山大学学报(医学科学版)》 2004年03期 期刊

关键词: 纤溶酶原 / 突变型K5 / 血管增生抑制因子 / 突变

下载(169)| 被引(3)

TNF-α诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡及其对小鼠B16细胞移植...  CNKI文献

目的:探讨TNF-α对小鼠B16黑色素瘤(MM)细胞凋亡的诱导及其对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用。方法:用不同浓度的TNF-α直接作用于培养的小鼠B16黑色素瘤细胞,36h后,采用流式细胞仪(FCM)及原位末端标记法(TUNEL法)检测B...

吉琼梅 朱振宇... 《中国肿瘤临床》 2004年22期 期刊

关键词: TNF-α / 黑色素瘤细胞 / 细胞凋亡 / 恶性黑色素瘤

下载(183)| 被引(2)

DTL120/60/2*450型大倾角花纹带式输送机  CNKI文献

DTL120/60/2*450型大倾角带式输送机,输送倾角可达30°,输送距离可达647m,运量可达600t/h, 装机功率900kW,是目前国内生产的输送倾角最大的强力带式输送机。

何万盈 侯红伟... 2003年度中国煤炭工业协会科学技术奖获奖项目汇编 2004-01-01 中国会议

关键词: 带式输送机 / 滚筒式 / DTL120/60/2*450

下载(37)| 被引(0)

人颗粒酶B基因的克隆、蛋白纯化及表达分析  CNKI文献

TIL具有抗肿瘤的活性 ,其中颗粒酶B在杀伤肿瘤细胞的过程中起了最重要的作用。本实验拟扩增GrB全序列 ,构建GrB的原核表达载体 ,从而建立其原核表达体系 ,获得高效表达的重组GrB ,纯化蛋白。用淋巴细胞分离液分离肿瘤...

李秀英 赖延东... 《现代免疫学》 2004年06期 期刊

关键词: 颗粒酶B / 淋巴细胞 / 原核表达 / GST融合蛋白

下载(133)| 被引(0)

人颗粒酶B真核表达载体的构建与表达分析  CNKI文献

目的构建能在Hep2细胞中表达的颗粒酶B的表达质粒pVAX1-GrB。方法用淋巴细胞分离液分离肿瘤组织中的淋巴细胞,并抽提RNA,用RT-PCR方法扩增其分泌蛋白颗粒GrB的全部外显子片段,利用基因重组技术将其定向插入pVAX1多克隆...

李秀英 夏良平... 《中国病理生理杂志》 2004年12期 期刊

关键词: 颗粒酶B / 淋巴细胞 / Hep2细胞

下载(70)| 被引(1)

抗乳铁蛋白单链抗体制备及鉴定  CNKI文献

目的制备特异性的可溶性抗乳铁蛋白单链抗体。方法用固相化的乳铁蛋白从天然噬菌体抗体库筛选出抗乳铁蛋白的单链抗体克隆,转化至大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达。表达产物以镍离子亲和层析法纯化,并进一步鉴定其纯度...

虞东芳 刘祖国... 《医学研究杂志》 2006年08期 期刊

关键词: 乳铁蛋白 / 噬菌体抗体库 / 单链抗体 / 筛选

下载(112)| 被引(0)

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