细胞因子与猪瘟病毒E_2基因真核双表达载体的构建及其免疫增... CNKI文献
构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2、IL 3基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果表明 ,构建了 2种猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2、3的真核表达质粒pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3。将 2种...
猪瘟基因疫苗免疫小鼠体液及细胞免疫动态变化研究 CNKI文献
目的 :探讨猪瘟基因疫苗免疫小鼠后机体产生体液和细胞免疫发生规律 ,为猪瘟基因疫苗推广应用提供科学依据。方法 :应用FACS、MTT法及间接ELISA试验对猪瘟基因疫苗免疫小鼠脾脏及外周血中CD+4 和CD+8淋巴细胞数、淋巴...
本研究应用原位杂交法、免疫组化、PCR法对肌肉注射猪瘟基因疫苗 pcDST、pcDSW后小鼠胫前肌中质粒存在的方式、部位及时间进行了动态观察。结果表明猪瘟病毒基因疫苗注射 3h后质粒就到达细胞核 ,至 2 0d在细胞核内仍呈...
IL-2与猪瘟病毒E_2基因真核双表达载体的构建及其免疫增强作... CNKI文献
应用DNA重组技术构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果是构建了猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2的真核表达质粒pIRSTIL 2。将质粒转染BHK 2 1细...
传染性法氏囊病病毒VP_2基因真核细胞表达载体的构建及免疫... CNKI文献
应用 DNA重组技术将含有 IBDV保护性抗原 VP2 质粒 ,以 Eco RI、xho I酶切 ,将酶切得到的 VP2 基因移入到载体 pc DNA3 CMV启动子下游 ,得到含有 IBDV VP2 基因的真核表达载体 pc D-VP2 基因疫苗。pc DVP2 体外转染细...
实验性鸡法氏囊病的病毒在体内分布及其消长规律研究 CNKI文献
本实验用免疫酶络化法分析雏鸡接种IBDV后,病毒在体内分布和病理变化。接种后6、12、24、48、72、96、120、144、168、192、216、240小时扑杀,每次扑杀5只。对照组雏鸡与实验组同步扑杀,每次扑杀3只。结果表明:雏...
免疫酶组化法检测人工感染鸡体内巴氏杆菌动态分布 CNKI文献
免疫酶组化法检测人工感染鸡体内巴氏杆菌动态分布陈创夫罗勇马正海乔军(塔里木农垦大学动物科学系,843300)禽霍乱是对禽类危害较大的细菌性疫病,全国各省、市、自治区均有发生,其发病数、死亡数仅次于鸡新...
应用细胞免疫组化法肌肉注射猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW后 ,对基因疫苗在小鼠胫前肌组织中的表达及组织病理学进行了动态观察 ,结果为 :pcDST质粒肌注后第 3天 ,pcDSW质粒肌肉注后第 5天 ,在胫前肌肌肉中可检测到表达产...
猪瘟基因疫苗免疫小鼠外周血细胞免疫动态变化研究 CNKI文献
应用FACS、MTT法对猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW免疫鼠外围血中CD+4 和CD+8淋巴细胞数、淋巴细胞的转化功能等动态变化进行了观察。结果 :pcDST、pcDSW猪瘟基因疫苗免疫小鼠后 ,小鼠的外周血淋巴细胞对LPS有强烈的反应性...
以LacZ为报告基因探讨促进基因表达及基因免疫应答物质的筛... CNKI文献
应用分子生物学技术构建了LacZ报告基因的pcDLacZ真核表达载体 ,并对多种促进基因表达的物质进行了筛选。应用筛选的促进基因表达物质对pcDST基因疫苗的免疫增强效果进行了观察。结果 :构建的LacZ报告基因的pcDLacZ真...
传染性法氏囊病Dot-ELISA双抗体夹心诊断法的建立及应用研究 CNKI文献
应用建立的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)双抗体夹心法检测IBDV抗原,证明该诊断法敏感度高,特异性强而且简便、快速。对52份病鸡各脏器病毒抗原检测表明,以法氏囊、盲肠扁桃体的检出率为最高。对人工感染鸡各...
采用RT PCR方法从新疆临床发病猪场采集的病料中扩增了CSFV流行株E2基因的主要抗原位点编码区,测定了15株CSFV的核苷酸序列。应用DNAstar计算机软件对6个地区6个代表株CSFV的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行了比较分...
牛支原体新疆分离株重组P81膜蛋白的表达及鉴定 CNKI文献
目的重组表达牛支原体P81膜蛋白,为研制牛支原体疾病诊断试剂提供研究基础。方法根据GenBank发表的牛支原体P81基因的编码序列,利用点突变试剂盒基于重叠延伸PCR原理设计5对引物,将P81基因的第165、690、1 455、1 674...
禽巴氏杆菌病是禽类养殖业危害较大的传染病之一.自发现该病一百多年来,各国兽医科技工作者对该病的病原学、菌苗研制、免疫机制的探讨作了大量的工作.本实验通过人工感染巴氏杆菌后,应用免疫酶染色对体内各组织器官中...
MTT法和FCM测定鼠淋巴细胞功能和亚类数量方法的建立 CNKI文献
建立了应用MTT法和FCM技术分别测定鼠淋巴细胞功能和T淋巴细胞亚类数量的方法。MTT法条件:ConA和LPS诱导剂量为20μg/ml,37℃作用48小时。MTT用量20μl,37℃作用4小时、FCM技术条件:抗鼠T淋巴细胞表面抗原CD4+、...
布氏杆菌和结核杆菌二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初... CNKI文献
本试验旨在利用二重实时荧光定量PCR技术建立鉴别诊断布氏杆菌和结核杆菌的方法。通过筛选布氏杆菌omp10、omp19、omp17、omp25、omp31和结核杆菌cfp10基因的最佳引物组合,建立二重实时定量PCR鉴别诊断方法,对该方法进...
孟茹 陈创夫... 《畜牧兽医学报》 2010年08期 期刊
关键词: 布氏杆菌 / 结核杆菌 / 二重实时荧光定量PCR
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AIR在羊种布鲁氏菌16M诱导的非典型自噬中的研究 CNKI文献
目的探讨膜融合相关蛋白TECPR1对羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7(RAW264.7)引起的非典型自噬及布鲁氏菌胞内生存繁殖能力的影响。方法根据AIR核苷酸序列,分别设计2条特异性小干扰RNA(short interfering RNA...
嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum,APH)是重要人兽共患病——人粒细胞无形体病(HGA)的病原体。APH专性侵染哺乳动物中性粒细胞,入侵后在细胞内形成包涵体逃逸溶酶体酶的杀伤,APH同时破坏宿主细胞的凋亡和自...
布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应子VceC功能的初步研究 CNKI文献
为研究布鲁氏菌(Brucella)Ⅳ型分泌系统效应子VceC的功能,本研究从羊种布鲁氏菌16M株基因组中克隆vceC基因片段,插入pEGFP-N1中,构建真核表达重组pEGFP-vceC。经脂质体转染HPT-8细胞,荧光显微镜观察、western blot鉴定...
布鲁氏菌M5-90ΔWboA基因缺失株的构建及免疫效果的初步评价 CNKI文献
为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-Δ WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA...